定医4种添加时测三用橡法同胶中剂

受控提取供试液的法同前处理：取上述材料提取液2ml于10ml具塞刻度试管中，用甲醇稀释至4ml，时测即得受控提取供试液，定医同法制备空白溶液。用橡

模拟提取供试液的胶中加剂制备：(1)胶塞：以模拟溶剂I～Ⅳ为提取溶剂，分别按每西林瓶10ml灌装，种添加待测胶塞，法同压铝盖，时测倒立放置，定医121℃高压灭菌lh，用橡放冷至室温，胶中加剂将各提取液分别合并至烧杯内，种添得胶塞供试液I～Ⅳ，法同同法制备空白。时测(2)EPDM卡箍密封圈：以模拟溶剂I～Ⅳ为提取溶剂，定医将EPDM卡箍密封圈装入管道中，灌装，密封，60℃高温烘箱放置24h，取出放冷，得EPDM卡箍密封圈供试液I～Ⅳ，同法制备空白。

模拟提取供试液的前处理：取上述模拟提取供试液I～Ⅲ各25ml，分别加入6mol／L盐酸溶液20、40、80μl，调至pH1.8～2-3，混匀。取甲醇、水各5ml依次活化固相萃取小柱，提取液以流速1.5～2ml／min通过固相萃取小柱，取水20m1淋洗，甲醇4ml洗脱，收集洗脱液于5ml具塞刻度试管，用甲醇定容，即得。取供试液Ⅳ10ml，加入6mol／L盐酸溶液100μl，调至pH1.2～1.5，加入氯化钠4g吸水，加入甲基叔丁基醚2ml，涡旋3min，取上清液于10ml具塞刻度试管中，萃取3次，合并上清液，40℃水浴，氮吹至0.5ml，甲醇定容至2m1，即得。制得模拟提取加标供试液Ⅰ～Ⅲ，同法制备空白溶液，色谱柱TC-C18柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相A为5mmol／L磷酸二氢钾溶液，B为乙腈：甲醇(9:1)，梯度洗脱(旺8min，A75％；8-12min，A75％-40％：12-25min，A40％：25-27min，A40％-75％；27L-35min，A75％)；流速1.0ml／min；柱温40℃；检测波长300nm；进样量20μl。记录峰面积，计算目标化合物在3种提取溶剂中的平均回收率(，n=3)，结果见表3。(2)取模拟溶剂Ⅳ10ml，加入低浓度对照品溶液8、20、40μl，摇匀，制得低、中、高浓度加标溶液，受控提取供试液的制备：取橡胶材料约1.0g，剪碎，置于中硼硅玻璃瓶内(规格100m1)，加入二氯甲烷40ml后密封，(16士5)℃超声波水浴提取30min，取出放冷，过滤，采用适量二氯甲烷荡洗容器，滤液及洗液置于100ml量瓶中，同法提取2次，合并滤液并定容，得材料提取液。

受控提取供试液的前处理：取上述材料提取液2ml于10ml具塞刻度试管中，用甲醇稀释至4ml，即得受控提取供试液，同法制备空白溶液。

模拟提取供试液的制备：(1)胶塞：以模拟溶剂I～Ⅳ为提取溶剂，分别按每西林瓶10ml灌装，加待测胶塞，压铝盖，倒立放置，121℃高压灭菌lh，放冷至室温，将各提取液分别合并至烧杯内，得胶塞供试液I～Ⅳ，同法制备空白。(2)EPDM卡箍密封圈：以模拟溶剂I～Ⅳ为提取溶剂，将EPDM卡箍密封圈装入管道中，灌装，密封，60℃高温烘箱放置24h，取出放冷，得EPDM卡箍密封圈供试液I～Ⅳ，同法制备空白。

模拟提取供试液的前处理：取上述模拟提取供试液I～Ⅲ各25ml，分别加入6mol／L盐酸溶液20、40、80μl，调至pH1.8～2-3，混匀。取甲醇、水各5ml依次活化固相萃取小柱，提取液以流速1.5～2ml／min通过固相萃取小柱，取水20m1淋洗，甲醇4ml洗脱，收集洗脱液于5ml具塞刻度试管，用甲醇定容，即得。取供试液Ⅳ10ml，加入6mol／L盐酸溶液100μl，调至pH1.2～1.5，加入氯化钠4g吸水，加入甲基叔丁基醚2ml，涡旋3min，取上清液于10ml具塞刻度试管中，萃取3次，合并上清液，40℃水浴，氮吹至0.5ml，甲醇定容至2m1，即得。制得模拟提取加标供试液Ⅳ，同法制备空白溶液，按色谱柱TC-C18柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相A为5mmol／L磷酸二氢钾溶液，B为乙腈：甲醇(9:1)，梯度洗脱(旺8min，A75％；8-12min，A75％-40％：12-25min，A40％：25-27min，A40％-75％；27L-35min，A75％)；流速1.0ml／min；柱温40℃；检测波长300nm；进样量20μl，记录峰面积，计算目标化合物在15％乙醇中的平均回收率(n=3)，结果见表3，各目标化合物在模拟介质中的回收率良好，符合方法学验证要求。

三、讨论

本研究建立了HPLC法测定医用橡胶中4种添加剂，以胶塞作为医用橡胶代表性材料，考察了胶塞中2在不同提取溶剂、提取方法、提取温度下的提取量，确定了不同用途材料的最佳受控提取条件。

二氯甲烷可使材料发生充分溶胀，使可提取物快速、充分释放。超声与回流提取效果相当，且超声温度对提取效率的影响不显著。通过对胶塞和EPDM卡箍密封圈进行受控提取，发现1、2、4均从材料基体中溶出，存在浸出风险，需进行进一步的模拟提取。在模拟提取试验中，1、2浸出量在15％乙醇溶液中浓度最高，说明1、2在脂溶性强的药物制剂中迁移的风险较大。此外，2的浸出量与介质的pH呈现一定相关性，在氢氧化钠溶液(pH11.0)中浸出量较高，说明在碱性环境中，2可能更容易浸出。

在整个药品生命周期内，医用橡胶与药品接触情况(震荡、高温、辐照等)多样，药品处方中的辅料同样可能与橡胶发生相互作用。理想的相容性研究，应选用具体的药物处方或空白药物处方(不含主药)作为提取溶剂。然而，市面上药物品种繁多，合理的模拟提取试验将会大大减少相容性研究的工作量。本研究考察了药品pH值、脂溶性对医用橡胶中4种添加剂浸出量的影响。根据不同用途橡胶，模拟其与药品的接触情况，选用灭菌和高温提取作为胶塞和EPDM卡箍密封圈的模拟提取条件，为药品与医用橡胶的相容性研究提供了参考。

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